Eve Best, 1971 yılında Londra'nın Ladbroke Grove kentinde doğmuştur. Oksford Üniversitesi ve Londra Kraliyet Tiyatro Okulu'ndan mezun olduktan sonra, Best oyunculuk kariyerine başlamıştır. İlk önemli rolü, 2000'lerin başında BBC Kanal 4 dizisi "The £1 scripts" dizisinde göründüğü zaman gelmiştir. Daha sonra, "A Midsummer Night's Dream" ve "The Woman in White" gibi tiyatro oyunlarında önemli rolleri ile tanınmıştır.
Best'in en büyük başarısı, 2010 yılında Kraliyet Tiyatro Şirketi'nde "Hedda Gabler" oyununda Hedda rolünü oynaması olmuştur. Bu performansıyla, 2011 yılında Laurence Olivier Ödülü'nü kazanmıştır. Best, ayrıca "The Queen" ve "The King's Speech" gibi filmlerde de rol almıştır.