Nilüfer Açıkalın, 1967'de İstanbul'da Makedonya göçmeni bir ailede doğdu. Mimar Sinan Üniversitesi Devlet Konservatuvarı Tiyatro Bölümünde oyunculuk eğitimi aldı ve 1987'den bu yana tiyatro, sinema ve televizyon dünyasında aktif olarak yer alıyor. İlk sinema deneyimi 1988'de Süreyya Duru'nun yönettiği 'Ada' filminde Türkan Şoray ile birlikte rol aldı ve bu film ona büyük şans sağladı.

Açıkalın, 'Deniz Bekliyordu' ve 'The Waiting Room' gibi filmlerdeki performanslarıyla sinema dünyasında tanınırlığını arttırdı. Ayrıca 'Hayde Bre', 'Broken Angel', 'Güle Güle', 'Ada', 'Beyoğlu Rüyası' ve 'Drawers' gibi önemli projelerde de rol aldı. Sinema kariyeri boyunca birçok ödül ve adaylık aldı.