Charlene Amoia, 25 Eylül 1982 tarihinde Buffalo, New York, ABD'de dünyaya geldi. İtalyan ve İspanyol kökenli bir aileden gelen Amoia, gençlik yıllarını Buffalo'da geçirdikten sonra ailesiyle birlikte Las Vegas'a taşındı. Oyunculuk kariyerine adım atmadan önce modellik yapan Amoia, hayallerinin peşinden giderek Los Angeles'a yerleşti ve burada profesyonel oyunculuk hayatına başladı.

Televizyondaki başarıyı sinemaya taşıyan oyuncu, CBS'in fenomen sitcom dizisi "How I Met Your Mother"daki (2005-2011) performansıyla dünya çapında tanındı.