Ana Cruz Kayne, 1984 yılında New Haven, Connecticut'da dünyaya geldi. Çocukluğundan beri oyunculukla ilgili olan Kayne, New York Üniversitesi Tisch School of the Arts'tan mezun oldu. Üniversite yıllarında çeşitli tiyatro prodüksiyonlarında yer aldıktan sonra, televizyon ve film sektörüne adım attı.

Kayne'in en çok tanınan çalışması, HBO'nun "The Wire" adlı televizyon dizisindeki rolleri arasındadır. "The Wire" dizisinde, Kayne iki ayrı karakteri canlandırdı: Bubbles'in sevgilisi Sherry ve avukat Wesen Henderson. Bu performanslarıyla büyük övgü kazandı ve eleştirmenler ona "büyüleyici bir yetenek" ve "yetenekli bir oyuncu" olarak övgülerle anlaştılar.

Ödülleri ve saygın yeri bakımından, Kayne'in en önemli başarısı, "The Wire" dizisindeki rolleriyle kazandı.